高效液相色谱仪的使用方法 高效液相色谱仪的使用方法实验报告( 三 )


53、从Ranges中选择Auao scale及合适的显示时间,单击OK,或选择“Use Ranges”调整 。
54、反复进行,直到图的比例合适为止 。
55、 4、 积分 (1)先调用所要分析的色谱图,从“Integration”中选择“Auto integrate”,从“Integration”中选择“Integration Results”,此时仪器将内置的积分参数给出积分结果 。
56、如积分结果不理想,再从“Integration”菜单中选择“Integration Events”选项,或单击快捷操作的“编辑/设定积分表”图标,此时,在屏幕下方左侧出现积分参数表,右侧为积分结果,在积分参数表中按实际的要求输入修改的参数,如斜率(Slope sensitivity)、峰宽(Peak width)、最小峰面积(Area reject)、最低峰高(Height reject)等 。
57、 (2)从“Integration”中选择“Integrate”选项或单击快捷操作的“对现有色谱图积分”图标,仪器即按照新设定的积分参数重新积分 。
58、 (3)若积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止 。
59、 (4)完成后,单击左边的“ˇ”图标,将积分参数存入方法 。
60、 5、 打印报告: (1)从“Report”菜单中选择“Specify report”选项,或单击最右侧快捷操作的“定义报告及打印格式”(右下角带叉的报告画面)图标,进入打印画面 。
61、 (2)根据实际要求选择报告的格式和输出形式等 。
62、可在“Calculate”右则的黑三角中选“Percent”(面积百分比),其它项不变 。
63、(如 “Destination”项下选择“Screen”; “Based On”选“Area”;“Sorted By”选“Signal”;“Repirt Style”选“Short”;选择“Add chromatogram Output(打印色谱图)”;选择“With Calibrated Peaks”;选择“Portrait”;可根据需要选择“Size”) 。
64、 (3)单击OK 。
65、 (4)选择快捷操作的“报告预览”图标,可预览报告的全貌 。
66、从“Report”菜单中,选择“Print Report”,则报告打印到屏幕上,如想输出到打字机上,则单击“Print”,即可进行报告的打印 。
67、最后,单击“close”退出此操作页面 。
68、 6、 定量分析 如果需要进行标准曲线制备,可按此项进行操作 。
69、 (1)一级校正表的建立: 在“Data Analysis”界面下,调用最低浓度的色谱图,在“栏“Calibration”下,选择“New Calibration Table”,选择“Automatic Setup Level”,并设校正级数为 “1”,单击“OK” 。
70、在画下方左侧出现校正表,右侧为校正图 。
71、在画面左下侧的校正表中选择所要的色谱峰,输入校正级数、化学物名称及浓度,如果采用内标法,需对内标峰进行标记 。
72、单击OK,工作站提示是否删除0浓度行,单击Yes。
73、 (2)二级校正表的建立: 调用第二个色谱图,在命令栏“Calibration”下,选择“Add Level”,设为“2”,单击“OK”,在画面左下侧的校正表中输入校正级数、化学物名称及样品浓度 。
74、(如需对校正表中的某些数据进行重新修正,可调用新的图谱,在命令栏“Calibration”下,选择“Recalibration”,并在校正表中输入校正级数,样品浓度 。
75、)此时,校正表右侧自动绘制各组分的标准曲线,并进行线性回归 。
76、单击校正表中的“Print”,可进行打印 。
77、五、关机关机前,用过缓冲盐溶液必须先用100%的水冲洗系统(打开排液阀,调流速为5ml/min,冲洗约5 min,然后调流速为1ml/min,待流速降下来后,关闭排液阀,再冲洗冲洗约20 min);然后用甲醇同法清洗20min,然后关泵 。
78、 注意:此方法适用于反相色谱柱,而正相色谱柱应用适当的溶剂冲洗 。