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1、将培养过夜的大肠杆菌(含质粒)溶液以13000rpm离心1分钟 。
2、弃去上清液,留下细菌,加入100微升溶液I,充分混悬,得到混浊液体 。
3、加入200ul溶液II,轻轻倒置20次,浑浊液体澄清 。
4、加入150ul溶液III,反向10次,出现大量白色沉淀 。
5、以13000rpm离心5分钟,并将上清液转移到一个新的小离心管中 。
6、加入等体积(约300ul)的异丙醇,剧烈搅拌5min,在-20下静置5min 。
7、以13000rpm离心5min,倒出上清液,用80%乙醇轻轻洗涤 。
【质粒的提取 质粒的提取实验报告】8、以13000rpm离心1分钟,倒出上清液 。将小离心管扣在吸水纸上,并在50的烘箱中保持5min 。
9、加入20ul无菌双蒸水溶解,并在-20下冷冻
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