如何分析高效液相色谱图? 怎么看高效液相色谱图


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1、HPLC分析要参考很多因素 。现在,反相色谱C18和VWD检测器用于分析 。1.峰值越高,物质的极性越大 。同时表明结构中含有杂原子和极性键,如羧基、氨基等 。2.峰值响应值越高,有机物中的共轭越多 。有时,这种物质会变色并进入可见区域 。3.峰型不好时,多含有双(多)基,尤其是氨基酸 。4.根据PH调节,峰型基本可以判断PKA,有利于判断物质结构 。5.当在各种条件下难以分离,且峰相似时,通常是两种或两种以上的异构体 。6.材料处理(如重结晶)所用的溶剂可以通过峰序列判断 。7.波长对应响应值来判断可能的结构 。(相当于四种主要光谱之一的紫外线)
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4、色谱图(色谱图am)样品流经色谱柱和检测器获得的信号-时间曲线也称为色谱洗脱曲线 。
【如何分析高效液相色谱图? 怎么看高效液相色谱图】5、冲洗基线流动相,在色谱柱和流动相达到平衡后,检测器测量一段时间的流出曲线 。通常应该平行于时间轴 。
6、噪声-基线信号的波动 。通常是由于电源接触不良或瞬态过载检测器流动相不稳定含有气泡或色谱柱污染造成的 。
7、漂移基线随时间缓慢变化 。由于电压、温度、流动相和流速等主要操作条件的不稳定性,柱中的污染物或固定相在连续洗脱时会发生漂移 。固定接地
8、色谱峰成分流经检测器时,相应的连续信号产生的曲线 。流出曲线上突出的部分 。正态色谱峰类似于对称正态分布曲线(高斯高斯曲线) 。不对称色谱峰有两种:3360领先峰和拖尾峰 。前者很少见 。
9、 tailingfactor,T)T=B/A) t=b/a,用于衡量色谱峰的对称性 。又称symmetryfactor或asymmetryfactor) 《中国药典》指定t应为0.95~1.05 。T0.95是前伸峰,T1.05是后伸峰 。
10、峰底-基线上从起点到终点的距离 。固定接地
11、峰高(h)-从最高点到最低点的距离 。
12、峰宽(w)峰两侧拐点处两条切线与基线两个交点之间的距离 。W=4.
13、半峰高处的峰宽(WH/2) 。Wh/2=2.355.
14、标准差()正态分布曲线x=1时的半峰宽(拐点) 。正常峰宽的拐点是峰高的0.607倍 。标准差表示组分在流出色谱柱过程中的分散程度 。小,分散度小,极浓度高,细柱效率高;相反,较大,峰值脂肪柱效率较低 。
15、峰区(a)-被峰顶和峰底包围的区域 。A=h=2.507h=1.064Wh/2h