平板划线法的步骤是什么? 平板划线法步骤图解


平板划线法的步骤是什么? 平板划线法步骤图解

文章插图
大家好,小动来为大家解答以上问题 。平板划线法步骤图解,平板划线法的步骤是什么?很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、融化培养基:将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热融化 。
2、倒平板:待培养基冷却至50左右,按无菌操作方法倒两平板(每皿约15ml),平铺凝固 。固定接地
3、在隔板上做标记,将整个盘子分成四个区域,在盘子底部有ABCD的不同面积 。各区之间的交角应在120左右(板块旋转一定角度约60),以充分利用整个板块的面积 。而且,采用这种分区方法,在D区和A区画的线可以是平行的,可以避免这两个区域的接触 。
4、划线操作:
5、(1)选取其他含菌样品:选取光滑的接种环,按无菌操作方法选取少量细菌 。固定接地
6、(2)划A区:将盘子倒扣在瓦斯(酒精)灯旁,左手取出盘底,使盘子尽量垂直于桌面 。培养基一面朝向煤气灯(此时皿盖朝上,留在煤气灯旁),右手拿接种环先在A区画3-4条连续的平行线(线的数量要视要挑的细菌数量而定) 。标记A区后,应立即将环上残留的细菌烧掉,以免因细菌过多而影响后续区域的分离效果 。烧接种环时,左手托住皿底,盖在皿盖上方(不要放在皿盖内),防止杂菌污染 。
7、(3)画其他区域:将平板培养基边缘的残菌烧掉后,冷却接种圈,将B区翻到上面 。接种环通过A区(菌源区)把细菌带到B区,然后画几条密集的平行线 。从B区到C区画一条线.最后,通过C区标记D区,D区的线要与A区平行,但标记D区时不要再接触AB区,以免两个区的浓菌液被带到D区,影响单菌落形成 。然后把碗底放进盖子里 。烧掉接种环上的残留细菌 。
8、恒温培养:将划线平板倒置,37(或28)培养,24小时后观察 。
9、模式:E
10、标记有多种形式 。平板可分为四个不同的区域进行标记 。第一个区域(A区)最小,是待分离细菌的来源区域 。第二和第三区(BC)是逐渐稀释的过渡区,第四区(D区)是关键区,使得该区出现大量的单菌落,用于选择纯菌株 。为了得到更典型的单个菌落,平板上四个区的面积分布应为DCBA 。
【平板划线法的步骤是什么? 平板划线法步骤图解】11、目的:
12、一种用接种环对平板培养基表面进行划分和标记来纯化和分离微生物的方法 。分离的目的是将微生物样品在固体培养基表面由点到线进行多次稀释 。用于微生物的分离,方便获得大肠杆菌和枯草杆菌的单克隆、混合悬液、无菌培养皿、水浴锅、接种环等 。