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通过“CLARITY”变形技术 , 小鼠的大脑(左)可以变成透明,但仍然完好的状态(右) 。
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CLARITY技术实现了完整的小鼠大脑成像
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透明小鼠的大脑图像 , 显示了海马区域的特征 在好莱坞电影《隐形人》里面 , 主角格里芬在自己身上进行了神秘的实验,使自己变成了隐形人;而在漫画《神奇四侠》中,隐形女因为突然遭受宇宙射线的辐射而意外得到超能力,能控制光波使自己和他人隐形 。现在,在斯坦福大学,一项名为“CLARITY”的新技术却能使老鼠的大脑变得透明 。
老鼠是非常常见的生物学实验动物,但科学家在研究它们不透明的大脑时却感到十分困扰 。如果你要在大脑中寻找某种蛋白质,如淀粉样β蛋白(引起阿尔茨海默症的蛋白)的位置,我们很容易就可以把荧光分子接到蛋白质上——这一过程成为免疫标记——但由于大脑是不透明的,你就必须将它切成很薄的切片,然后才能观察这些发光的标记,最后将这些切片上的信息在电脑里重新组合 。
如果能发明一项使大脑变透明的技术 , 以上这些繁琐的问题就可以迎刃而解 , 而这也正是 Kwanghun Chung所做到的 。他与斯坦福大学卡尔·戴瑟罗特(Karl Deisseroth)博士领导的科学小组合作,研制出了一种名为“CLARITY”的新技术 。该技术不仅能使大脑变得透明 , 更重要的是,它能保证大脑中最重要的组成部分保持在原位 。每一个神经元、蛋白质、脱氧核糖核酸(DNA)链以及化学信号物质都锁定在原来的位置,做了标记的分子如抗体或荧光标记等都能轻松地进行检测 。
一开始,Chung利用甲醛和丙烯酰胺混合溶液来保存一个分离的冷藏大脑标本 。甲醛将大脑中大部分的分子如蛋白质和DNA等与丙烯酰胺连接起来,当加热到体温时就变成一个硬化的透明胶体 。然后,Chung给大脑标本通上一股电流,将没有连接到胶体上的东西除去 。整个过程有点像用铅笔绘制一个场景 , 然后把边缘擦去 。
经过这番处理,我们就得到了一个透明的老鼠大脑 。它包括了每一个细胞的内容物,却去掉了细胞的轮廓 。它之所以透明,是因为去除了能散射并反射光线的脂类 。这些脂类也起着屏障的作用,去除之后,我们就可以往透明的大脑里注入标记分子 。“你可以对整个组织进行拍摄,然后再重建为三维模式 , ”Chung说,“而不需要去做切片 。”我们可以使大脑中某一类型的神经元发出黄绿色的荧光,然后以大脑整体的角度观察神经元的位置,而不必再用不透明的切片进行重组 。
这里还有另一张透明的小鼠大脑图像 。你可以看到海马区域的特征,该区域与学习、记忆和空间导航能力有关 。每一种颜色代表着一种连接在大脑分子上的标记 。“CLARITY技术使免疫标记和大批量成像成为可能 , 或许将取代超薄切片,”麻省理工学院的Sebastian Seung说,“从大脑中获得的信息很大部分来自染色标记 。”
与常规的染色-切片方法相比,CLARITY技术节省了时间和精力 , 其获得的结果也更清晰,因为在对大脑进行切片的时候,难免会对科学家想要研究的组织造成损伤 。这项技术也提供了新的可能性 。在此之前,如果你在大脑里注入一个标记 , 你必须将标本解剖才能获得结果 。如今,科学家可以在“透明化”的大脑上增加更多的标记 。如果有了某些有趣的进展,你还可以继续在同样的完整大脑上进行实验 。
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