ctab法提取dna ctab法提取dna的优缺点

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文章插图
1、(1)取材料 , 加液氮研磨成粉末状 , 迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;(2)加入800 μl的CTAB提取缓冲液 , 混匀(CTAB在65℃水浴预热) , 每5min轻轻震荡几次 , 20min后12000 r/min , 离心15 min;(3)小心吸取上清液 , 加入等体积的酚:氯仿(各400μl)溶液 , 混匀 , 4℃ , 12000 r/min , 离心10 min;(4)小心吸取上清液 , 加入等体积的氯仿 , 混匀 , 4℃ , 12000 r/min , 离心10 min 。
2、(5)重复步骤(4)1-2次 , 以蛋白层不出现为止;(6)取上清 , -20℃沉淀1h , 4℃ , 12000 r/min , 离心10 min;(7)弃去上清液 , 用70%乙醇洗涤沉淀2次;(8)室温下干燥后(一般干燥5-15 min) , 溶于30-50 μl DEPC去离子水中 , 于-20℃或者-70℃下保存备用 。
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